DB61∕T 999.15-2015 保健用品功能学评价指导原则及试验要求 第15部分改善睡眠、醒脑

ICS11.020C50DB61陕西省地方标准DB61/T999.15—2015保健用品功能学评价指导原则及试验要求第15部分：改善睡眠、醒脑通窍保健类功能学评价动物试验GuidelinesandtestrequirementsforfunctionalevaluationofhealthcaresuppliesPart15:Animaltestsforfunctionalevaluationofhealthcaresuppliesonimprovingsleepandrefreshing2015-12-29发布2016-03-01实施陕西省质量技术监督局发布DB61/T999.15—2015I目次前言................................................................................II 1范围..............................................................................1 2术语和定义........................................................................1 3试验项目..........................................................................1 4结果判定..........................................................................3 5注意事项..........................................................................3 DB61/T999.15—2015II前言DB61/T999《保健用品功能学评价指导原则及试验要求》分为以下16个部分：——第1部分：总则；——第2部分：改善微循环类功能学评价动物试验；——第3部分：改善微循环类功能学评价人体试验；——第4部分：乳房保健类功能学评价动物试验；——第5部分：乳房保健类功能学评价人体试验；——第6部分：胃肠功能保健-助消化类功能学评价动物试验；——第7部分：胃肠功能保健-助消化类功能学评价人体试验；——第8部分：胃肠功能保健-通便类功能学评价动物试验；——第9部分：胃肠功能保健-通便类功能学评价人体试验；——第10部分：皮肤瘙痒类功能学评价动物试验；——第11部分：皮肤瘙痒类功能学评价人体试验；——第12部分：妇女卫生保健类功能学评价动物试验；——第13部分：妇女卫生保健类功能学评价人体试验；——第14部分：眼部保健类功能学评价人体试验；——第15部分：改善睡眠、醒脑通窍保健类功能学评价动物试验；——第16部分：改善睡眠、醒脑通窍保健类功能学评价人体试验。本部分为DB61/T999的第15部分。DB61/T998《保健用品安全性评价指导原则及试验方法》与DB61/T999《保健用品功能学评价指导原则及试验要求》、DB61/T1000《保健用品产品标准编写规范》、DB61/T1001《保健用品微生物限度检查》共同构成了陕西省保健用品系列地方标准。下面列出了这些地方标准的结构：a)DB61/T998《保健用品安全性评价指导原则及试验方法》分为以下6个部分：1)第1部分：安全性评价指导原则；2)第2部分：皮肤急性毒性试验；3)第3部分：皮肤长期毒性试验；4)第4部分：皮肤刺激性试验；5)第5部分：皮肤过敏性试验；6)第6部分：眼部刺激性试验。b)DB61/T1000《保健用品产品标准编写规范》分为以下8个部分：1)第1部分：总则；2)第2部分：保健贴类产品标准编写规范；3)第3部分：眼贴类产品标准编写规范；4)第4部分：含药芯类产品标准编写规范；5)第5部分：喷涂类产品标准编写规范；6)第6部分：清洗液类产品标准编写规范；7)第7部分：器具类产品标准编写规范；DB61/T999.15—2015III8)第8部分：功能服装类产品标准编写规范。c)DB61/T1001《保健用品微生物限度检查》分为以下5个部分：1)第1部分：总则；2)第2部分：菌落总数测定；3)第3部分：铜绿假单胞菌检验；4)第4部分：金黄色葡萄球菌检验；5)第5部分：霉菌和酵母菌数测定。本部分根据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本部分由陕西省食品药品监督管理局提出并归口。本部分起草单位：陕西省食品药品监督管理局、陕西省质量技术监督局。本部分主要起草人：曹永孝、肖雪、李伟、张扬。本部分由陕西省食品药品监督管理局负责解释。本部分首次发布。联系信息如下：单位：陕西省食品药品监督管理局电话：029-62288000地址：西安市高新六路56号邮编：710065DB61/T999.15—20151保健用品功能学评价指导原则及试验要求第15部分：改善睡眠、醒脑通窍保健类功能学评价动物试验1范围DB61/T999的本部分规定了改善睡眠、醒脑通窍保健类保健用品的功能学评价动物试验的试验项目、试验方法、观察指标、结果判定和注意事项。本部分适用于陕西省改善睡眠、醒脑通窍保健类保健用品的功能学评价动物试验。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2.1睡眠sleep是一种与觉醒相对的、自发性的、周期性的和可逆性的感觉减退、意识减弱甚至消失，机体与外界的联系减弱，失去对环境精确适应能力的生命状态。2.2记忆memory是指识记、保持、再认识和重现客观事物所反映的内容和经验的能力。2.3翻正反射rightingreflex是指动物四脚朝上后，主动恢复正常体位的过程。3试验项目3.1适用原则宜采用镇静试验、催眠试验评价受试品改善睡眠的功能；宜采用学习记忆试验评价受试品醒脑通窍的功能。3.2镇静试验镇静试验应以活动计数为指标记录试验动物的自主活动，反映受试品的镇静功能。本试验宜选用的试验方法包括：a)计算机视频跟踪技术测定法；b)红外线自发活动记录仪记录法；c)走动时间和举双前肢试验；d)Vidiomex.V图像分析法；e)开放场试验；f)探测身体辐射热分析法；DB61/T999.15—20152g)拮抗中枢兴奋试验。3.3催眠3.3.1对阈下剂量催眠药物的协同作用应采用小鼠为试验动物，观察受试品对腹腔注射阈下剂量镇静催眠药物（如戊巴比妥钠）的协同睡眠作用；应记录翻正反射消失和恢复的时间，以睡眠潜伏期、睡眠时间和睡眠率为指标反映受试品的协同催眠作用。其中，各指标应按照以下计算方法确定：a)睡眠潜伏期：睡眠潜伏期=翻正反射消失的时间-给镇静催眠药的时间；b)睡眠时间：睡眠时间=翻正反射恢复的时间-翻正反射消失的时间；c)睡眠率：睡眠率=翻正反射消失的动物数/腹腔注射镇静催眠药的动物数。3.3.2氯苯丙氨酸大鼠失眠模型本模型试验应在向大鼠腹腔注射氯苯丙氨酸28小时～30小时且其出现失眠状态后，检测以下物质的含量和特性：a)脑组织中氨基酸类神经递质（如5-羟色胺、γ-氨基丁酸、多巴胺）的含量；b)脑组织中一氧化氮含量和/或一氧化氮合酶活性；c)血清细胞因子（如白介素1、白介素2、肿瘤坏死因子、干扰素）的含量。3.3.3大鼠电刺激失眠模型应将大鼠置于刺激器内，通过笼底部的电栅刺激足底，每30分钟刺激30秒，连续8小时，造成大鼠失眠，并记录其脑电图。本模型试验的观测指标应包括：a)总睡眠时长；b)觉醒时间；c)慢波睡眠I期时长；d)慢波睡眠U期时长；e)异相睡眠时长；f)快动眼睡眠时相时长。3.4学习记忆3.4.1水迷宫法应调置水迷宫仪的水温，保持水温恒定。对试验动物进行空间分辨学习记忆训练后，将其放入装有图像采集系统的水迷宫仪中，进行数据采集。应通过观测以下指标观察试验动物的学习记忆能力：a)总活动度；b)总平均速度；c)逃避潜伏期；d)上台前路程；e)上台前平均速度。水迷宫试验类型包括Morris水迷宫法、通道式水迷宫法、隐蔽式站台水迷宫法和逃避式站台水迷宫法。DB61/T999.15—201533.4.2跳台法应选小鼠为试验动物进行本试验。跳台仪底部铜栅电流强度应适当。当训练时，小鼠触电后跳上跳台以逃避电击，而获得记忆。记忆力与下台潜伏期呈正比。本试验的观测指标及其计算方法应符合以下规定：a)试验动物遭电击的时间即为其在台下的时间；b)试验动物逃避电击的时间即为其在台上的时间；c)错误次数即为试验动物跳下台的次数。3.4.3避暗法本方法又名穿梭箱法。利用鼠类喜好钻黑洞的习性，将明、暗两箱用隔板分开，底部留洞；并在暗箱底部铺设带电铜栅。将小鼠放入明箱，当其钻入暗箱即受到电击而返回明箱，从而获得记忆。在此过程中应对试验指标进行观测，并应在24小时后再次依法测定。本试验的观测指标应包括：a)试验动物由明室进入暗室的潜伏期；b)试验动物5分钟内进入暗室的次数。其中，其记忆力的长短与钻洞潜伏期呈正比，与进入暗室的次数成反比。3.4.4物体识别法物体识别试验应分为以下3个阶段：a)适应期：应先将试验动物依次放入实验装置中，使其适应环境；b)熟悉期：应在实验装置中放置两个相同的玩具，并记录试验动物在每个玩具上的探索时间；c)测试期：用一个大小相同而形状不同的玩具替换其中的一个玩具，并分别记录试验动物探索新旧玩具的时间，计算分辨指数；其中，分辨指数的计算方法为：分辨指数=（探索新玩具时间-探索旧玩具时间）/（探索新玩具时间+探索旧玩具时间）。4结果判定4.1若试验结果能满足以下条件，则应判定该受试品具有改善睡眠功能：a)至少采用一种镇静类型试验和一种催眠试验；b)受试品组与对照组相比较，试验结果间具有显著性差异（有统计学意义）。4.2若试验结果能满足以下条件，则应判定该受试品具有醒脑通窍功能：a)至少采用2种学习记忆试验；b)受试品组与对照组相比较，试验结果间具有显著性差异（有统计学意义）。5注意事项在本试验中应注意：a)试验动物应以大、小鼠为主；b)试验环境应安静、光线适当；c)在学习记忆试验中，为增加受试品的敏感性，可用M-胆碱受体阻断剂制备记忆缺损模型或选用β-淀粉样肽前体蛋白转基因小鼠为试验动物。_________________________________