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1《生物化学B》实验课教学大纲课程代码：14114课程英文名称：BiochemistryB开课对象：生物工程、制药工程，本科（四年制）学时：25/85一、课程性质、任务和作用生物化学是研究微生物、植物、动物及人体内化学分子与化学反应的科学，是运用化学的原理在分子水平上解释生命现象的科学。近年来，生物化学与其衍生出的分子生物学的发展突飞猛进，生物化学已越来越成为生物学的共同语言，成为生物学领域的前沿学科。生物化学不仅是生物学的基础学科，而且也是一门重要的实验性学科，生物化学理论是在科学研究实验基础上高度总结的结论性观点。因此，要掌握生物化学知识，必需要进行生物化学实践。目前生化实验的基础理论与技术手段已广泛地应用于生物学研究的各个领域，生物化学实验技术成为生物学研究的基本技术。开展生物化学实践课程的教学，可以让生物工程、制药工程专业学生在生化课堂之外亲自动手做实验，以应证并深入了解生化反应的原理，熟悉各种生化研究方法与技术，以培养独立进行研究的能力。最终使学生巩固和加深对生物化学基础理论的理解，掌握生物化学基本技术的操作，培养基本的科研思维和实验数据的整理和分析，为其后续专业课程如酶工程、生化工程、基因工程、生化制药等的学习，以及将来生物工程、制药工程的科学研究打下扎实的基础。即通过本课程的实验教学要达到以下三方面的目的：1.培养学生严谨的科学态度，开拓创新的思维能力，实验设计的思维方法，以及规范的书写实验报告论文等知识，提高分析问题和解决问题的能力。2.掌握基本的生物化学实验方法和技术，通过本课程的严格训练，为学生进一步学习，掌握复杂的综合性的生物化学技术打下扎实的基础。3.通过实验，进一步加深对生物化学理论知识的理解。二、教学目的要求和内容实验一、肝组织中核酸的分离提取与鉴定[教学目的]1．掌握从动物组织中提取核酸的原理、操作技术及核酸组分的鉴定方法。2.熟悉离心计的操作使用。3.了解核酸的组成。[教学内容]1．肝组织中核酸的提取。2．核酸的水解。3．核糖、脱氧核糖、嘌呤、磷酸的定性鉴定。主要仪器离心机学时：4实验二、酶的性质2[教学目的]1．掌握酶具有高复专一性的原理。2．掌握影响酶促反应速度的因素及原理。[教学内容]1．酶的专一性。2．温度对酶促反应影响。3．PH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响。主要仪器水浴箱，冰箱学时：4实验三、激素对血糖浓度的影响以及血糖浓度的测定[教学目的]1．掌握激素对血糖浓度影响的原理。2．掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的方法与原理。3．熟悉酶标仪、离心机、移液器的使用。[教学内容]1．兔子耳静脉取血。2．兔子皮下注射激素。3．兔子耳静脉再取血。4．血清分离。5．用酶标仪，通过葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度变化。主要仪器酶标仪，移液器，兔笼，离心机，生化培养箱学时：4实验四、血浆脂蛋白LDL、HDL的测定[教学目的]1．掌握LDL、HDL的测定原理。2．熟悉可见分光光度计的使用。3．熟悉移液器的使用．4.了解血清LDL、HDL的正常范围及临床意义。[教学内容]1．血浆中LDL、HDL的提取。2．LDL、HDL含量测定。主要仪器移液器，可见分光光度计，离心机学时：4实验五、醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质[教学目的]1．掌握电泳的基本原理与技术，掌握醋酸纤维素薄膜电泳的原理及操作方法。2.熟悉电泳仪的使用。33.了解醋酸纤维素薄膜电泳所分离的血清蛋白质的各带谱及其临床意义。[教学内容]1．血清在醋酸纤维薄膜上点样。2.电泳6．染色观察结果。主要仪器电泳仪，培养器学时：4实验六、转氨基作用与氨基酸纸层析[教学目的]1．掌握转氨基作用的原理。2．掌握纸层析的原理，掌握纸层析法分离和鉴定氨基酸的原理和操作技术。3．了解RF值及计算。[教学内容]1．转氨基作用。2．纸层析。3．喷印三酮，计算RF值．主要仪器层析缸，离心机，喷液器，电吹风学时：4三、教材及参考书教材：《生物化学实验指导》浙江中医学院基础医学系生物化学教研室编2004。参考书目：1.《生物化学实验教程》第一版主编：刘粤梅，朱怀荣北京，人民卫生出版社（第一版），19972．《生物化学实验方法和技术》主编：张龙翔人民教育出版社，19813.《生物化学与分子生物学实验技术》主编：厉朝龙浙江大学出版社，2000四、考核方法本实验课程成绩为25分，记入到生物化学课程总成绩中﹙生化成绩＝生化理论成绩75﹪＋实验课成绩25﹪﹚。实验课成绩由参加实验、实验操作技能考核及实验报告三部分组成。对不参加实验者，实验课成绩记零分。4五、时汇总表实验序号实验项目实验类型0演示1验证2综合3设计学时数010203040506肝组织中核酸的分离提取与鉴定酶的性质激素对血糖浓度的影响以及血糖浓度的测定血浆脂蛋白LDL、HDL的测定醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质转氨基作用与氨基酸纸层析112112444444合计实验个数：6合计学时数：24